Alfred Pennyworth
Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Alastair Duncan
Zawód: Lokaj Bruce'a Wayne'a
Lokaj Bruce'a, a także pomocnik Batmana. Mimo, że Alfred ma koło 50, to jednak często jego uwagi pozwalają złapać złoczyńców, a czasami sam lokaj prowadzi własne śledztwo.
Bruce Wayne / Batman
Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Rino Ramano
Zawód: Przedsiębiorca / Obrońca Gotham City
Bruce Wayne już 3 lata działa jako Batman, ale także kontynuuje pracę ojca, przez kierowanie Wayne Industries. Bruce jednak jest najdumniejszy ze swojej nocnej działalności i to właśnie Batmanowi poświęca całą swoją uwagę, ze względu, na co jako Bruce Wayne jest uznawany za lubiącego rozrywki kawalera.
Batman dzięki najnowszej technologii i systemowi Bat-Wave, jest na bieżąco informowany o wszystkich przestępstwach w mieście co pozwala mu na szybką reakcję i zapewnienia bezpieczeństwa na ulicach Gotham City.
Chief Rojas Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Edward James Olmos
Zawód: Komendant policji Gotham
Dla Rojasa, Batman jest pospolitym bandytą. Według komendanta nie ma miejsca dla działającego po za prawem strażnika Gotham. Priorytetem dla Rojasa jest schwytanie Batmana.
Detective Ethan Bennett Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Steve Harris
Zawód: Detektyw w GCPD
Przyjaciel Bruce Wayne'a. Ethan Bennett i Bruce znają się od czasów szkoły średniej. Podczas gdy jego nowy partner Detektyw Ellen Yin, widzi wszystko czarno na białym, on widzi szarość. Dlatego jest skłonny pozwolić Batmanowi na działalność, bo nowy obrońca Gotham robi więcej niż policja i pomaga całemu miastu.
Detective Ellen Yin Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Ming Na
Zawód: Detektyw w GCPD
Detektyw Ellen Yin, nowa policjantka w Gotham, która przeniosła się z Metropolis by szukać nowych wyzwań. Zawsze działa według regulaminu, dlatego, mimo, że nie ma nic przeciwko Batman'owi to jednak, jako policjantka nie może pozwolić na naruszanie prawa.
Mayor Marion Grange Pierwsze pojawienie się: The Big Heat
Głos: Adam West
Zawód: Burmistrz Gotham
Marion Grange jest burmistrzem Gotham i bliskim przyjacielem rodziny Wayne'ów.
Bystry polityk, nie potrafi jednak zaakceptować nieodpowiedzialnego zachowania Bruce'a.
Złoczyńcy
Bane Pierwsze pojawienie się: "Traction"
Głos: Joaquim de Almeida
Zawód: Najemnik
Ochotnik do testów genetycznych, Bane stał się najemnikiem, z którym nikt nie może się równać. Bane, przy pomocy jadu aktywuje swoją wielką siłę i powiększa swój wzrost. Batman pokonał go tylko dzięki użyciu Bat-Botu.
Catwoman Pierwsze pojawienie się: "The Cat and the Bat"
Głos: Gina Gershon
Zawód: Włamywacz
Catwoman, a.k.a. Selina Kyle jest największą włamywaczką w Gothman, przy swoich kradzieżach wykorzystuje swoją kocią zwinność, a także pomoc ze strony swojego kota. W przeciwieństwie do innych wrogów Batmana, jedynym celem działanie Catwoman jest chęć zysku, mimo to potrafi czasami zrobić dobry uczynek. Pomimo wysiłków Batman'owi nie udało się jej schwytać, a sama Catwoman ucieszyła się ze spotkaniem z Rycerzem Nocy i nie odmówiła sobie przelotnego flirtu.
Cluemaster Pierwsze pojawienie się: "Q&A"
Głos: Glen Shadix
Zawód: Uczestnik programu "Think, Thank, Thunk".
Niezadowolony przegrany teleturnieju dla dzieci "Think, Thank, Thunk" Arthur Brown, utopił swoje smutki w nagrodzie pocieszenia (dożywotnim zapasie "Kremelos"), przez co stał się bardzo gruby. Pod pseudonimem 'Cluemaster' i przy pomocy karzełków, próbował zemścić się na organizatorach teleturnieju "Think, Thank, Thunk".
Firefly
Pierwsze pojawienie się: The Big Heat
Głos: Jason Marsden
Zawód: Sabotażysta
Sabotażysta, Firefly wykonał kilka zadań dla Goth-Corp. Wykorzystując specjalny sprzęt, który pozwalał mu latać i roztapiać najgrubsze ściany, wykonywał swoje zadania bez problemu, ale do czasu, gdy natrafił na Batmana.
Joker Pierwsze pojawienie się: "The Bat in the Belfry"
Głos: Kevin Michael Richardson
Zawód: Szaleniec
Nemezis Batmana, Joker jest maniakalnym arlekinem, którego dziwaczny wygląd, oraz nieomylny instynkt dla absurdalności zapewniły mu reputacje najniebezpieczniejszego przestępcy. Dla Jokera, każde naruszenie, które on popełnia jest żartem, w którym on próbuje sprawić, by jego ofiary umarły z śmiechem na ustach.
Man-Bat
Pierwsze pojawienie się: "The Man Who Would Be Bat"
Głos: Peter MacNicol (Langstrom)
Zawód: Szalony naukowiec
Obsesja Batman'em, Dr. Kirka Langstroma, doprowadza do stworzenia doświadczalnej surowicy, która przekształca Dr. Kirka w ohydnego Man-Bata, pół człowieka, pół nietoperza. Po przekształceniu się Langstrom powiększył swoją siłę, uzyskał też klejący śluz, który skleja ofierze określone obszary, ostre jak brzytwa pazury, pragnienie krwi i widzenie jak przez radar.
Mr. Freeze Pierwsze pojawienie się: The Big Chill
Głos: Clancy Brown
Zawód: Złodziej
Dawniej Victor Fries był zwykłym złodziejem, ale w trakcie ucieczki przed Batmanem, doszło do wypadku, w wyniku, którego Victor został zamrożony w laboratorium krenologicznym. Po wypadku Victor odkrywa swoje nowe zdolności (może zamrażać wszystko, co chce, ale sam również musi nosić specjalny kombinezon, który utrzymuje jego ciało w odpowiedniej temperaturze). Terez Mr. Freeze jest bezwzględnym zbrodniarzem, który wykorzystuje swoje zdolności do stworzenia z Gotham Lodowego Królestwa .
The Penguin
Pierwsze pojawienie się: "The Call of the Cobblepot"
Głos: Tom Kenny
Zawód: Złodziej i Pan ptaków.
Oswald Cobblepot, podobnie jak Bruce Wayne uchodzi za miliardera. Jednak w przeciwieństwie do Bruce'a, "Ozzy" jest niewychowany, samolubny, arogancki i prostacki. Pigwin próbuje wykorzystać tresowane ptaki i swój arsenał parasoli, by przy pomocy zbrodni odbudować majątek i status rodziny Cobblepot'ów.
Arnold Wesker i Scarface
Pierwsze pojawienie się: "The Big Dummy"
Głos: Dan Castellaneta
Zawód: Szalony brzuchomówca
Kiedy brzuchomówca Arnold Wesker i jego kukła "Scarface" zostali wygwizdani jednej nocy, wtedy Wesker i "Scarface" wrócili w nocy i obrabowali całą widownię. Od tego czasu Wesker i "Scarface" prowadzą działalność przestępczą, gdzie "Scarface" jest szefem a Wesker tylko wykonawcą rozkazów.